반복 유산토토 커뮤니티 융모 성 빌리의 특징적인 DNA 메틸화 프로파일
키 포인트
- 재발 유산 (RM)은 모든 임신의 약 07%이며 임신 22 주 이전에 3 개 이상의 연속 유산으로 정의됩니다 RM은 임신의 가장 고통스러운 합병증 중 하나이지만, RM의 원인은 1/4의 경우에 알려지지 않았다 최근 마이크로 어레이 분석에 따르면 정상적인 배아 핵형을 갖는 예상치 못한 RM의 빈도는 5-25%였다
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- 다르게 메틸화 된 유전자들 중토토 커뮤니티, SPATS2L의 인핸서 영역은 AA 대조군보다 RM 환자 (n = 19)토토 커뮤니티 상당히 더 높은 메틸화되었다 (n = 19; 평균 메틸화 수준, 520 %-vs-289 %, p<0.001), resulting in reduced expression of SPATS2L protein in the former. Functionally, depletion of SPATS2L in extravillous trophoblast cells decreased their invasion and migration abilities.
- 우리의 데이터는 특히 RM 환자의 융모 성 빌리가 정상 임신과 비교하여 뚜렷한 DNA 메틸화 프로파일을 나타내며,이 변화된 DNA 메틸화 상태가 Villi토토 커뮤니티 SPATS2L과 같은 유전자의 변경된 발현을 통해 배아 발달의 진행을 방해 할 수 있음을 나타냅니다
요약
다른 임신 단계토토 커뮤니티 Plantenal 및 태아 발달 동안 DNA 메틸화에 의해 엄격하게 조절되는 전사 프로그램의 조절 조절은 재발 성 유산을 유발할 수 있습니다 여기, 우리는 RM을 앓고있는 환자와 인공 낙태를 겪은 건강한 여성 (각각 n = 5)의 융모 성 빌리 및 디 셀 조직토토 커뮤니티 게놈 전체 DNA 메틸화를 조사했습니다 우리는 13,426 및 5,816 CPG 부위가 각각 융모 성 융모 및 데디 두아토토 커뮤니티 다르게 메틸화된다는 것을 발견했습니다 RM 환자토토 커뮤니티 Decidua가 아닌 융모 성 빌리의 DNA 메틸화 프로파일은 AA 대조군과 분명히 구별되었다 다르게 메틸화 된 유전자 중토토 커뮤니티, SPATS2L의 인핸서 영역은 AA 대조군보다 RM 환자 (n = 19)토토 커뮤니티 상당히 높은 메틸화되었다 (n = 19; 평균 메틸화 수준, 520%-vs-289%, p< 0.001), resulting in reduced expression of SPATS2L protein in the former. Functionally, depletion of SPATS2L in extravillous trophoblast cells decreased their invasion and migration abilities.
우리의 데이터는 특히 RM 환자의 융모 성 빌리가 정상 임신과 비교하여 뚜렷한 DNA 메틸화 프로파일을 나타내며,이 변화된 DNA 메틸화 상태가 Villi토토 커뮤니티 SPATS2L과 같은 유전자의 변경된 발현을 통해 배아 발달의 진행을 방해 할 수 있음을 나타냅니다
다른 임신 단계토토 커뮤니티 Plantenal 및 태아 발달 동안 DNA 메틸화에 의해 엄격하게 조절되는 전사 프로그램의 조절 조절은 재발 성 유산을 유발할 수 있습니다 여기, 우리는 RM을 앓고있는 환자와 인공 낙태를 겪은 건강한 여성 (각각 n = 5)의 융모 성 빌리 및 디 셀 조직토토 커뮤니티 게놈 전체 DNA 메틸화를 조사했습니다 우리는 13,426 및 5,816 CPG 부위가 각각 융모 성 융모 및 데디 두아토토 커뮤니티 다르게 메틸화된다는 것을 발견했습니다 RM 환자토토 커뮤니티 Decidua가 아닌 융모 성 빌리의 DNA 메틸화 프로파일은 AA 대조군과 분명히 구별되었다 다르게 메틸화 된 유전자 중토토 커뮤니티, SPATS2L의 인핸서 영역은 AA 대조군보다 RM 환자 (n = 19)토토 커뮤니티 상당히 높은 메틸화되었다 (n = 19; 평균 메틸화 수준, 520%-vs-289%, p< 0.001), resulting in reduced expression of SPATS2L protein in the former. Functionally, depletion of SPATS2L in extravillous trophoblast cells decreased their invasion and migration abilities.
우리의 데이터는 특히 RM 환자의 융모 성 빌리가 정상 임신과 비교하여 뚜렷한 DNA 메틸화 프로파일을 나타내며,이 변화된 DNA 메틸화 상태가 Villi토토 커뮤니티 SPATS2L과 같은 유전자의 변경된 발현을 통해 배아 발달의 진행을 방해 할 수 있음을 나타냅니다
연구 배경
RM (Reburrent Ohscarriage)은 모든 임신의 약 07% 인 빈도는 임신 22 주 이전에 3 개 이상의 연속 유산으로 정의되며 RM은 임신의 가장 고통스러운 합병증 중 하나입니다 그러나 RM의 원인은 4 분의 1의 경우 알려지지 않았다 정상적인 배아 핵형을 갖는 예상치 못한 RM의 빈도는 최근의 마이크로 어레이 분석에 따르면 5-25%였다 이전에 정상적인 배아 핵형을 가졌던 RM 환자의 예후는 이전 배아 이수성 환자의 예후보다 나쁘기 때문에 RM의 원인은 즉각적인 문제입니다
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RM (Reburrent Ohscarriage)은 모든 임신의 약 07% 인 빈도는 임신 22 주 이전에 3 개 이상의 연속 유산으로 정의되며 RM은 임신의 가장 고통스러운 합병증 중 하나입니다 그러나 RM의 원인은 4 분의 1의 경우 알려지지 않았다 정상적인 배아 핵형을 갖는 예상치 못한 RM의 빈도는 최근의 마이크로 어레이 분석에 따르면 5-25%였다 이전에 정상적인 배아 핵형을 가졌던 RM 환자의 예후는 이전 배아 이수성 환자의 예후보다 나쁘기 때문에 RM의 원인은 즉각적인 문제입니다
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연구 결과
첫째, Genome 전체 DNA 메틸화 프로파일은 RM 환자 (n = 5) 및 AA 대조군 (n = 5)의 POC 조직을 사용하여 확립되었다 모든 다르게 메틸화 된 문제 (DMP)를 사용한 감독되지 않은 양방향 계층 적 클러스터 분석은 융모 성 빌리토토 커뮤니티 RM과 AA 사이의 명확하게 별개의 DNA 메틸화 시그니처를 보여 주지만 Decidua토토 커뮤니티는 그렇지 않은 것으로 나타났습니다 (그림 1)
첫째, Genome 전체 DNA 메틸화 프로파일은 RM 환자 (n = 5) 및 AA 대조군 (n = 5)의 POC 조직을 사용하여 확립되었다 모든 다르게 메틸화 된 문제 (DMP)를 사용한 감독되지 않은 양방향 계층 적 클러스터 분석은 융모 성 빌리토토 커뮤니티 RM과 AA 사이의 명확하게 별개의 DNA 메틸화 시그니처를 보여 주지만 Decidua토토 커뮤니티는 그렇지 않은 것으로 나타났습니다 (그림 1)
다음으로, 우리는 RM 환자의 융모 성 빌리토토 커뮤니티 일관되게 메틸화 된 유전자를 식별하기 위해 인핸서 영역토토 커뮤니티 DMP를 분석했습니다 우리는 다르게 메틸화 된 프로브 영역에 대해 5 개의 정량적 피로스 쿼싱 DNA 메틸화 분석을 설계했다 5 개의 유전자 중, SPATS2L, MAST4 및 EXOC6B의 DNA 메틸화 수준은 AA 대조군 (n = 19, P<0.01) Interestingly, there was a clear positive correlation between DNA methylation levels and gestational weeks in SPATS2L in both RM and AA groups (R2=0.217 and R2=0.485 in RM and AA, respectively) (Figure 2).
AA 대조군보다 RM 환자의 융모 성 빌리토토 커뮤니티 SPATS2L의 인핸서 영역토토 커뮤니티 상당히 높은 수준의 DNA 메틸화가 검출 되었기 때문에, 본 발명자들은 그 안에 SPATS2L 단백질의 수준을 정량화 하였다 우리는이 단백질이 주로 세포 영양 모세포 세포의 세포질토토 커뮤니티 발현되지만 AA 대조군보다 RM 환자토토 커뮤니티 더 낮은 수준토토 커뮤니티 발현된다는 것을 발견했다 (도 3)
영양막 세포토토 커뮤니티 SPATS2L의 기능을 평가하기 위해, 우리는 인간의 사치스러운 영양막 세포주 HTR8/SVNEO토토 커뮤니티 2 개의 독립적 인 siRNA에 의해 spats2L 유전자 발현을 무너 뜨렸다 SPATS2L의 배치는 이들 세포의 침습적 능력을 상당히 감소시켰다 (P< 0.05) (Figure 4). Furthermore, the scratch assay revealed significantly decreased cell migration of SPATS2L-depleted cells (P< 0.05). Taken together, these data imply that altered SPATS2L expression may affect cell migration and invasion during the early development of the placenta.
영양막 세포토토 커뮤니티 SPATS2L의 기능을 평가하기 위해, 우리는 인간의 사치스러운 영양막 세포주 HTR8/SVNEO토토 커뮤니티 2 개의 독립적 인 siRNA에 의해 spats2L 유전자 발현을 무너 뜨렸다 SPATS2L의 배치는 이들 세포의 침습적 능력을 상당히 감소시켰다 (P< 0.05) (Figure 4). Furthermore, the scratch assay revealed significantly decreased cell migration of SPATS2L-depleted cells (P< 0.05). Taken together, these data imply that altered SPATS2L expression may affect cell migration and invasion during the early development of the placenta.
연구 요약 및 미래 관점
단순히 융모 성 빌리를 조사하고 동일한 RM 환자로부터 유래 된 조직을 결정한 우리의 게놈 전체 DNA 메틸화 분석은 융모 성 Villi토토 커뮤니티 명확하게 구별되는 질병 관련 DNA 메틸화 프로파일을 나타냈다 이것은 특정 조직토토 커뮤니티 변경된 DNA 메틸화 프로그램이 성공적인 임신의 유지에 관여 함을 나타냅니다 또한, 영향을받는 유전자, SPATS2L의 조절 조절은 엑스트라 빌 영양막 세포의 기능을 하향 조절 하였다 이러한 후성 유전 학적 변경은 특정 유전 적 다형성의 배경토토 커뮤니티 환경 적 요인에 반응하여 유도 될 수있다 더 크고 잘 특성화 된 인구에 대한 추가 연구는 Rm을 담당하는 후성 유전자 관련 메커니즘을 더 잘 이해할 수있게 해줄 것입니다
단순히 융모 성 빌리를 조사하고 동일한 RM 환자로부터 유래 된 조직을 결정한 우리의 게놈 전체 DNA 메틸화 분석은 융모 성 Villi토토 커뮤니티 명확하게 구별되는 질병 관련 DNA 메틸화 프로파일을 나타냈다 이것은 특정 조직토토 커뮤니티 변경된 DNA 메틸화 프로그램이 성공적인 임신의 유지에 관여 함을 나타냅니다 또한, 영향을받는 유전자, SPATS2L의 조절 조절은 엑스트라 빌 영양막 세포의 기능을 하향 조절 하였다 이러한 후성 유전 학적 변경은 특정 유전 적 다형성의 배경토토 커뮤니티 환경 적 요인에 반응하여 유도 될 수있다 더 크고 잘 특성화 된 인구에 대한 추가 연구는 Rm을 담당하는 후성 유전자 관련 메커니즘을 더 잘 이해할 수있게 해줄 것입니다
Publication
과학 보고서
제목 : 재발 성 유산토토 커뮤니티 융모 성 빌리의 특징적인 DNA 메틸화 프로파일
출판 날짜 : 2022 년 7 월 27 일 기본적으로 영국
저자 :
Yosuke Matsumoto1, Keiko Shinjo2, Shoko Mase1, Masaki Fukuyo3, Kosuke Aoki4,
Fumiko Ozawa1, Hiroyuki Yoshihara1, Shinobu Goto1, Tamao Kitaori1, Yasuhiko Ozaki1,
Satoru Takahashi5, Atsushi Kaneda3, Mayumi Sugiura -Ogasawara1 & Yutaka Kondo2
제휴 :
1 Nagoya City University 의과 대학의 산부인과학과, Nagoya 467-8601, Japan
2 Nagoya University 의과 대학의 암 생물학 부서, Nagoya 466-8550, Japan
3 Chiba University, 의과 대학 분자 종양학과
Chiba 260-8670, Japan
4 Nagoya University 의과 대학 신경 외과학과 Nagoya 466-8550, 일본
5 Nagoya City University, 실험 병리학 및 종양 생물학과
Nagoya 467-8601, 일본 의학 대학원
doi : 101038/s41598-022-15656-y
과학 보고서
제목 : 재발 성 유산토토 커뮤니티 융모 성 빌리의 특징적인 DNA 메틸화 프로파일
출판 날짜 : 2022 년 7 월 27 일 기본적으로 영국
저자 :
Yosuke Matsumoto1, Keiko Shinjo2, Shoko Mase1, Masaki Fukuyo3, Kosuke Aoki4,
Fumiko Ozawa1, Hiroyuki Yoshihara1, Shinobu Goto1, Tamao Kitaori1, Yasuhiko Ozaki1,
Satoru Takahashi5, Atsushi Kaneda3, Mayumi Sugiura -Ogasawara1 & Yutaka Kondo2
제휴 :
1 Nagoya City University 의과 대학의 산부인과학과, Nagoya 467-8601, Japan
2 Nagoya University 의과 대학의 암 생물학 부서, Nagoya 466-8550, Japan
3 Chiba University, 의과 대학 분자 종양학과
Chiba 260-8670, Japan
4 Nagoya University 의과 대학 신경 외과학과 Nagoya 466-8550, 일본
5 Nagoya City University, 실험 병리학 및 종양 생물학과
Nagoya 467-8601, 일본 의학 대학원
doi : 101038/s41598-022-15656-y